Quando Jakes esce di prigione, i fratelli si riuniscono e visitano l'orfanotrofio in cui sono cresciuti, solo per scoprire che rischia di essere chiuso dalla contea per non aver pagato le tasse. Con un piccolo aiuto da parte di James Brown come predicatore di risveglio, i Blues Brothers sono divinamente ispirati a raccogliere i 5.000 dollari americani di cui l'orfanotrofio ha bisogno per rimanere aperto. Nella loro missione divina, devono riunire la loro vecchia band e raccogliere i soldi suonando in vari concerti in città. Le avventure selvagge della band includono lo schivare malvagi neonazisti, suonare in un bar di bifolchi e sfuggire per poco alla folle Carrie Fisher, l'ex fidanzata di Jakes, che vuole vederlo morto. Infine, i ragazzi devono recarsi a un concerto nella sala da ballo del Palace Hotel e consegnare i 5.000 dollari americani all'ufficio del sindaco della contea, dando vita a uno dei più folli e isterici inseguimenti d'auto della storia del cinema.
La storia è una storia di redenzione per Jake, detenuto in libertà vigilata, e per Elwood, suo fratello di sangue, che partono per una "missione di Dio" per evitare il pignoramento dell'orfanotrofio cattolico romano in cui sono cresciuti. Per farlo, devono riunire la loro band R&B e organizzare un'esibizione per guadagnare i 5.000 dollari necessari a pagare le tasse di proprietà dell'orfanotrofio. Lungo il percorso, vengono presi di mira da una "donna misteriosa" omicida, da neonazisti e da una band country e western, mentre la polizia li insegue senza sosta.
Gli Universal Studios, che avevano vinto la gara d'appalto per il film, speravano di sfruttare la popolarità di Belushi sulla scia del Saturday Night Live, del film Animal House e del successo musicale di The Blues Brothers; ben presto si trovarono nell'impossibilità di controllare i costi di produzione. L'inizio delle riprese fu ritardato quando Aykroyd, che era alle prime armi con la sceneggiatura cinematografica, impiegò sei mesi per consegnare una sceneggiatura lunga e non convenzionale che Landis dovette riscrivere prima della produzione, che iniziò senza un budget definitivo. Sul set di Chicago, le feste e l'uso di droghe di Belushi causarono lunghi e costosi ritardi che, insieme ai distruttivi inseguimenti in auto rappresentati sullo schermo, resero il film finale una delle commedie più costose mai prodotte.
A causa del timore che il film potesse fallire, gli incassi iniziali furono meno della metà di quelli che normalmente ricevevano film simili. Uscito negli Stati Uniti il 20 giugno 1980, il film ha ricevuto recensioni per lo più positive da parte della critica e ha incassato oltre 115 milioni di dollari nelle sale cinematografiche di tutto il mondo prima della sua uscita in home video ed è diventato un classico di culto nel corso degli anni. Un sequel, Blues Brothers 2000, è stato pubblicato nel 1998 con un insuccesso critico e commerciale.
Nel 2020, il film è stato selezionato per essere conservato nel National Film Registry degli Stati Uniti dalla Biblioteca del Congresso in quanto "culturalmente, storicamente o esteticamente significativo".
Il cantante blues e piccolo criminale Jake Blues esce di prigione dopo aver scontato tre anni e viene prelevato dal fratello di sangue Elwood con la sua Bluesmobile, una vecchia auto della polizia malconcia. Elwood ne dimostra le capacità saltando un ponte levatoio aperto. I fratelli visitano l'orfanotrofio cattolico romano in cui sono cresciuti e apprendono da Suor Mary Stigmata ("Il Pinguino") che verrà chiuso se non verranno riscossi 5.000 dollari di tasse sulla proprietà. Durante un sermone del reverendo Cleophus James alla Triple Rock Baptist Church, Jake ha un'illuminazione: possono riformare la loro band, i Blues Brothers, che si è sciolta mentre Jake era in prigione, e raccogliere i soldi per salvare l'orfanotrofio.
Quella sera, gli agenti di stato tentano di arrestare Elwood per guida con patente sospesa a causa di 116 multe per divieto di sosta e 56 violazioni del codice della strada. Dopo un inseguimento ad alta velocità attraverso il centro commerciale Dixie Square, i fratelli scappano. La mattina dopo, mentre la polizia arriva al bordello dove vive Elwood, una donna misteriosa fa esplodere una bomba che demolisce l'edificio, ma miracolosamente lascia Jake ed Elwood illesi e li salva dall'arresto.
Jake ed Elwood iniziano a rintracciare i membri della band. Cinque di loro si esibiscono come "Murph and The MagicTones" in una sala deserta dell'Holiday Inn e accettano subito di unirsi alla band. Un altro li rifiuta perché è il maître di un ristorante costoso, ma i fratelli si rifiutano di lasciare il ristorante finché non cede. Sulla strada per incontrare gli ultimi due membri della band, i fratelli trovano la strada che attraversa Jackson Park bloccata da una manifestazione del Partito Nazista Americano su un ponte; Elwood li fa cadere dal ponte nella East Lagoon. Gli ultimi due membri della band, che ora gestiscono un ristorante di cibo soul, si riuniscono alla band contro il parere della moglie. Il gruppo riunito si procura strumenti e attrezzature da Ray's Music Exchange a Calumet City e Ray, come al solito, accetta un pagherò.
Mentre Jake cerca di prenotare un concerto, la donna misteriosa fa esplodere la cabina telefonica che sta usando; ancora una volta, lui rimane miracolosamente illeso. La band si imbatte in un concerto al Bob's Country Bunker, un honky-tonk di Kokomo, Indiana. I ragazzi conquistano la folla chiassosa, ma fanno lievitare il conto del bar più del loro stipendio e fanno infuriare i Good Ol' Boys, il gruppo country che era stato prenotato per il concerto.
Rendendosi conto che hanno bisogno di un grande spettacolo per raccogliere i soldi necessari, i fratelli convincono il loro vecchio agente a prenotare la sala da ballo del Palace Hotel, a nord di Chicago. Montano un altoparlante sulla Bluesmobile e girano per l'area di Chicago promuovendo il concerto e avvisando la polizia, i neonazisti e i Good Ol' Boys della loro posizione. La sala da ballo è gremita di fan del blues, agenti di polizia e Good Ol' Boys. Jake ed Elwood eseguono due canzoni e poi sgattaiolano via dal palco, poiché la scadenza delle tasse si sta avvicinando rapidamente. Un dirigente della casa discografica offre loro un anticipo di 10.000 dollari per un contratto di registrazione - più che sufficiente per pagare le tasse dell'orfanotrofio e la cambiale di Ray - e poi mostra ai fratelli come sgattaiolare fuori dall'edificio senza farsi notare. Mentre fuggono attraverso un tunnel di servizio, vengono affrontati dalla donna misteriosa: La vendicativa ex-fidanzata di Jake. Dopo che la sua raffica di proiettili di fucile M16 li lascia ancora una volta miracolosamente illesi, Jake offre una serie di scuse ridicole che lei rifiuta, ma quando lo guarda negli occhi si interessa di nuovo a lui, permettendo ai fratelli di fuggire verso la Bluesmobile.
Jake ed Elwood tornano verso Chicago inseguiti da decine di poliziotti statali e locali e dai Good Ol' Boys. Alla fine riescono a sfuggire a tutti con una serie di manovre improbabili, tra cui una miracolosa fuga dai neonazisti che sfidano la gravità. Arrivati al Richard J. Daley Center, si precipitano all'interno dell'adiacente edificio del Municipio di Chicago, presto seguiti da centinaia di poliziotti, agenti di stato, squadre SWAT, vigili del fuoco, guardie nazionali dell'Illinois e polizia militare. Trovando l'ufficio dell'assessore della contea di Cook, i fratelli pagano il conto delle tasse. Proprio mentre la ricevuta viene timbrata, vengono arrestati dalla folla di agenti. In prigione, la banda suona "Jailhouse Rock" per i detenuti.